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技术服务> 慢病毒
Easy RNAi慢病毒构建与包装

服务简介:

RNA干扰(RNA interference, RNAi) 是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA, dsRNA) 导入细胞后,能特异性地降解该mRNA,从而产生相应的功能表型缺失。RNAi提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段,有助于研究该基因在生物模型系统中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。现今发现的主要起干扰作用的RNAi主要有两类小分子RNA:一类是microRNA(miRNA);另一类是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制备的方法一般有:化学合成siRNA,哺乳动物细胞载体shRNA克隆和慢病毒载体shRNA克隆。

YUHUAXUEHECHENGsiRNAHEJIYUSHUNSHIBIAODAZAITIGOUJIANDEshRNAXIANGBI,LIYONGMANBINGDUGOUJIANDEshRNA:YIFANGMIANKEYIKUOZENGSHUNSHIBIAODADEZAITISHIYONG,LINGYIFANGMIAN,lentivirus-shRNAKELONGJINGGUOMANBINGDUBAOZHUANGXITONGBAOZHUANGHOU,KEYONGYUGANRANCHUANTONGZHUANRANSHIJINANYUZHUANRANDEXIBAOXIRUYUANDAIXIBAO,XUANFUXIBAOHECHUYUFEIFENLIEZHUANGTAIDEXIBAO,BINGQIEZAIGANRANHOUKEYIZHENGHEDAOSHOUGANRANXIBAODEJIYINZU,JINXINGZHANGSHIJIANDEWENDINGBIAODA。

JIMANSHENGWUKEJI(SHANGHAI)YOUXIANGONGSIZHUYAOTIGONGYIMANBINGDUWEIZHUDEYINGYONGYULINCHUANGQIANXIBAOXUESHIYANHEZHENGTIDONGWUSHIYANDEZHENDUIBUTONGJIYINHEYAOWUBABIAODEGEZHONGJIYONGXINGBINGDUKELI。LIYONGXIANGGUANZAITIBAshRNADAORUXIBAO,ZAITIZHONGDEU6QIDONGZIQUEBAOshRNABIAODA;ZHEIZHONGZHUANGZAILEshRNAZAITIKEBEICHUANDIDAOZIDAIXIBAOZHONGQU,CONGERSHIJIYINDECHENMOSHIKEYICHUANDE。

表1.各种siRNA制备方法比较

比较项目 化学合成siRNA DNA载体shRNA Lentiviral-shRNA
siRNA结构 双链RNA或发夹结构RNA 发夹结构RNA 发夹结构RNA
RNA干扰持续时间 <72小时 <10天 >30天
适合的细胞系 转染效率大于70%的细胞 转染效率大于20%但是可以传代的细胞 几乎所有细胞
单次制备费用
重复使用费用
是否可自行扩增 不可以 可以 不可以
构建稳定表达siRNA的细胞株 不满足 满足,但有风险 满足,可以同时制备多种稳定表达细胞系
组织特异性干扰实验 不满足 满足 满足
干细胞分化实验 不满足 不满足 满足
裸鼠荷瘤实验 低重复性 低重复性 高重复性
转基因knockdown实验 不满足 不满足 满足


推荐使用:

1.适用于在难以转染的细胞中进行的RNA干扰研究,如原代神经细胞,干细胞,肿瘤细胞等;
2.适用于快速建立稳定表达沉默特定基因的细胞株;
3.适用于In vivo 实验,包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射等;
4.适用于转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。


服务流程:


其它相关服务:

1.AAV腺相关病毒包装;
2.稳定细胞系构建;
3.cas9敲除细胞系构建。


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